凝胶色谱法的原理
1、问题一:凝胶色谱法的原理 以多孔凝胶(如葡萄糖,琼脂糖,硅胶,聚丙烯酰胺等)作固定相,依据样品分子量大小达到分离目的。
2、分离原理: 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
3、凝胶渗透色谱法的原理如下:凝胶色谱,又称空间排阻色谱。它是利用某些凝胶对混合物各组分因分子量不同,其阻滞作用也不同而进行分离、分析的方法。
4、样品在多孔凝胶柱中随着流动相的移动,待分离的组分沿凝胶颗粒间的孔隙移动,大分子移动路径较短,先流出色谱柱,小分子由于扩散进入凝胶颗粒内部,迁移路径长,后流出色谱柱,实现分离。
5、凝胶色谱又叫排阻色谱,用的是葡聚糖凝胶的孔径大小不一,来对大分子化合物进行分类。分子大的,不能通过凝胶的内部孔的,最先流出,分子小的,可以进入孔中的,会被凝胶保留,会较晚流出。
6、间接法:用一组分子量不等的、单分散的试样为标准样品,分别测定它们的淋出体积和分子量,则可确定二者之间的关系。仪器:GPC仪的组成:泵系统、(自动)进样系统、凝胶色谱柱、检测系统和数据采集与处理系统。
凝胶渗透色谱的实验部分
1、中等体积的分子产生部分渗透。小分子可渗透到凝胶孔穴里去而受阻滞,因有一个平衡过程而较晚地被流动相冲洗出来。这样,试样组分基本上按分子大小受到不同阻滞而先后流出色谱柱,从而实现分离目的。
2、凝胶渗透色谱法主要用于有 机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。
3、问题一:凝胶色谱法的原理 以多孔凝胶(如葡萄糖,琼脂糖,硅胶,聚丙烯酰胺等)作固定相,依据样品分子量大小达到分离目的。
4、凝胶色谱法的原理是:凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分子体积的大小进行分离的。
凝胶渗透色谱对分析样品的要求
制样要注意不要有大颗粒不溶物堵塞色谱柱,进样前要用0.45um滤膜过滤,还要注意浓度不可太大,不能超过柱子耐受力,也不可太小,让检测器检测不到也不好。
每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限,色谱柱有使用的上限和下限。
仪器测试样品的浓度在2g/l左右(一般用20毫克试样配制成10毫升的样品,分子量较低的试样浓度可以适当高些)。配制好的样品需放置24小时左右以使试样充分溶解。
凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。
凝胶渗透色谱的基本原理
问题一:凝胶色谱法的原理 以多孔凝胶(如葡萄糖,琼脂糖,硅胶,聚丙烯酰胺等)作固定相,依据样品分子量大小达到分离目的。
凝胶色谱法的原理是:凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分子体积的大小进行分离的。
分离原理: 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
测定高分子聚合物的摩尔质量应选择什么方法?
1、高分子聚合物的相对分子质量很大,质量摩尔浓度的数值就会很小,蒸气压,凝固点,沸点的变化值很小,不易测得。
2、关于粘度法测定高聚物的摩尔质量解释如下:粘度法是常用的测定高聚物摩尔质量的方法之一,用粘度法所得的摩尔质量称为粘均摩尔质量。
3、对于当前所知的元素原子的摩尔质量,和已知单质或化合物分子组成的物质,我们已经知道,这些物质的摩尔质量,其数值等于这些物质相对式量。
4、与一般的无机物或低分子的有机物不同,高聚物多是摩尔质量大小不同的大分子混合物,所以通常所测高聚物摩尔质量是一个统计平均值。测定高聚摩尔质量的方法很多,而不同方法所得平均摩尔质量也有所不同。
用凝胶渗透色谱(GPC),其中用水作为流动相
光凝胶色谱采用水溶液作流动相进,称为过滤凝胶色谱(HFC),而用有机溶剂为流动相时,称为凝胶渗透色谱(GPC)。
凝胶渗透色谱的流动相与水相似。根据查询相关资料信息,凝胶过滤色谱法是体积排阻色谱法的一种,以水或者缓冲液为流动相。以有机溶剂为流动相的一般叫凝胶渗透色谱法。凝胶渗透色谱的流动相与水相似。
凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
0条大神的评论